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小伙伴关心的问题：PCR四步（pcr三步反应）,本文通过数据整理汇集了PCR四步（pcr三步反应）相关信息，下面一起看看。

PCR四步（pcr三步反应）

一般的聚合酶链式反应由20到35个循环组成，每个循环包括以下3个步骤：

变性(Denaturation)：

利用高温（93-98℃）使双链DNA分离。高温将连接两条DNA链的氢键打断。在第一个循环之前，通常加热长一些时间以确保模板和引物完全分离，仅以单链形式存在。该步骤时间1-2分钟，接下来PCR仪就控制温度进入循环阶段。退火或称接合,复性(Annealling)：

在DNA双链分离后，降低温度使得引物可以结合于单链DNA上。此阶段的温度通常低于引物熔点5℃。错误的退火温度可能导致引物不与模板结合或者错误地结合。该步骤时间1-2分钟。延伸(Extension)：

DNA聚合酶由降温时结合上的引物开始沿着DNA链合成互补链。此阶段的温度依赖于DNA聚合酶。该步骤时间依赖于聚合酶以及需要合成的DNA片段长度。传统的Taq估计合成1000bp/min、较新的Tbr（来自于嗜热菌Thermus brockianus）约40秒、商业公司生产的融合型聚合酶仅需约10-15秒。

平时我会分享分子生物学相关实验的基础原理和实验操作技巧，以及生物信息学小技巧等。

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